首页：金巴黎娱乐挂机《朗伯比尔定律》：1852年，比尔(Beer)参考了布给尔(Bouguer)1729年和朗伯(Lambert)在1760年所发表的文章，提出了分光光度的基本定律，即液层厚度相等时，颜色的强度与呈色溶液的浓度成比例，从而奠定了分光光度法的理论基础。

　　根据Lambert-Beer定律，光的吸收与吸收层厚度成正比。比耳定律说明光的吸收与溶液浓度成正比，如果同时考虑吸收层厚度和溶液浓度对光吸收率的影响，即得朗伯-比耳定律。

　　即A=εbc (A为吸光度，ε为摩尔吸光系数，b为液池厚度，c为溶液浓度)

　　1854年，杜包斯克(Duboscq)和奈斯勒(Nessler)等人将此理论应用于定量分析化学领域，并且设计了第一台比色计。到1918年美国国家标准局制成了第一台紫外可见分光光度计。

　　此后紫外可见分光光度计经不断改进，又增加了自动记录、自动打印、数字显示微机控制等各种实用功能。，仪器的灵敏度和准确度不断提高，其应用范围也不断扩大。目前紫外分光光度计常用于水质监测与农食产品等的检测中。

　　其在农产品和食品分析中的应用主要是检测蛋白质、赖氨酸、葡萄糖、维生素C、硝酸盐、亚硝酸盐、砷、汞等，在植物生化分析中可用于检测叶绿素、全氮和酶的活力等，在饲料分析中可用于检测烟酸、棉酚、磷化氢和甲酯等。

　　紫外可见吸收光谱是由于分子中的某些基团吸收了紫外可见辐射光后，发生了电子能级跃迁而产生的吸收光谱。由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构，其吸收光能量的情况也就不会相同。因此，每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线，可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量，这就是分光光度定性和定量分析的基础。

　　1、使用的吸收池必须洁净，并注意配对使用。量瓶、移液吸管均应校正、洗净后使用。

　　2、取吸收池时，手指应拿毛玻璃面的两侧，装盛样品以池体的4/5为度，使用挥发性溶液时应加盖，透光面要用擦镜纸由上而下擦拭干净，检视应无溶剂残留。吸收池放入样品室时应注意方向相同。用后用溶剂或水冲洗干净，晾干防尘保存。

　　3、供试品溶液浓度除各该品种已有注明外，其吸收度以在0.3～0.7之间为宜。

　　4、测定时除另有规定外，应以配制供试品溶液的同批溶剂为空白对照，采用1cm石英吸收池，在规定的吸收峰±2nm以内，测几个点的吸收度或由仪器在规定的波长附近自动扫描测定，以核对供试品的吸收峰位置是否正确，并以吸收度最大的波长作为测定波长，除另有规定外吸收度最大波长应在该品种项下规定的测定波长±2nm以内。

　　5、供试品应取2份，如为对照品比较法，对照品一般也应取2份。并进行平行操作，每份结果与平均值的偏差应在±0.5%以内。

　　6、选用仪器的狭缝宽度应小于供试品吸收带的半宽度，否则测得的吸收度值会偏低，狭缝宽度的选择应以减少狭缝宽度时供试品的吸收度不再增加为准，对于大部分被测品种，可以使用2nm缝宽。

　　1、若实验中需大幅度改变测试波长，需稍等片刻，等灯热平衡后，重新校正“0”和“100%”点。然后再测量。

　　2、指针式仪器在未接通电源时，电表的指针必须位于零刻度上。若不是这种情况，需进行机械调零。

　　3、比色皿使用完毕后，请立即用蒸馏水冲洗干净，并用干净柔软的纱布将水迹擦去，以防止表面光洁度被破坏，影响比色皿的透光率。

　　5、1900型等分光光度计，由于其光电接收装置为光电倍增管，它本身的特点是放大倍数大，因而可以用于检测微弱光 电信号，而不能用来检测强光。否则容易产生信号漂移，灵敏度下降。针对其上述特点，在维修、使用此类仪器时应注意不让光电倍增管长时间暴露于光下，因此在 预热时，应打开比色皿盖或使用挡光杆，避免长时间照射使其性能漂移而导致工作不稳。

　　7、比色杯必须配套使用，否则将使测试结果失去意义。在进行每次测试前均应进行比较。具体方法如下：

　　分别向被测的两只杯子里注入同样的溶液，把仪器置于某一波长处。 将某一个池的透射比值调至100%，测量其它各池的透射比值，记录其示值之差及通光方向，如透射比之差在±0.5%的范围内则可以配套使用，若超出此范围应考虑其对测试结果的影响。

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